以下是培养基的制备步骤，如下：
（一）准确称量试剂 根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。
（二）校正ph值 将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用ph6.8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1n
naoh和1n hcl调节ph值到适宜范围内。
（三）过滤 将玻璃漏斗置铁架上，再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。
培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因此，在同一温度条件下，采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下，菌体吸收水分后，其蛋白质易于凝固变性，因为蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。